siRNA和miRNA是研究基因功能的强大工具。siRNA,是一类人工合成的双链RNA分子,长度通常在19-23个核苷酸之间,通过特异性结合并降解细胞内的目标mRNA,实现基因沉默,从而抑制特定基因的表达。miRNA,即microRNA,是一类机体内源产生的的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,能够通过与mRNA的3'非翻译区(3'UTR)部分互补结合对基因表达进行调控。
Celthy siRNA/miRNA体外转染试剂是一款专门针对siRNA和miRNA转染的转染试剂,可在广泛的细胞系中产生超高转染效率,适用于siRNA/miRNA相关的基因研究,从源头上解决转染效率低的难题。
产品优势
超高转染效率:凭借优化的配方和转染机制,能够出色的将siRNA和miRNA导入细胞
加入1nM siRNA可达到90%以上的沉默效率。
已经验证过贴壁细胞和悬浮细胞,均可以达到90%以上的基因沉默效率。原代细胞,可达到80%以上的沉默效率。
在广泛的细胞系中,产品能实现1nM的siRNA可超过90%的表达效率,避免脱靶效应。
极低细胞毒性
通过精心的设计和严格的筛选,尽可能减少对细胞的损伤,维持细胞的正常生理功能以及细胞内环境的稳定,提高实验结果的可靠性。
广泛的细胞适用性
适用于多种细胞转染,包括HeLa、mcf7或NIH-3T3等贴壁细胞,以及难以转染的悬浮细胞系,如K562或THP-1细胞,可达到80%的沉默效率。
Celthy siRNA/miRNA体外转染试剂具有更高的沉默效率
在多种细胞中验证具备优异的转染效率
常见问题
1、DNA转染和siRNA转染有什么不同?
1)siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。
2)用于转染DNA的转染试剂和方法并不适用于转染siRNA。
3)siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。
2、转染试剂转染后需要换液吗?
对于换液可以区分两种情况:
1)转染之前如果没有换液应在转染6 小时左右后换液,以保证细胞生长所需营养。
2)如果转染之前如果有换液,可以按照平时等到培养基出现营养不足时换液。
3、转染试剂可以冻存吗?
不可冻存,因为转染试剂是一种PEI阳离子转染试剂,低温下冻存,会破坏PEI转染试剂的活性,因此最好是4 度储存,保持最好的转染效能。
4、若想提高转染效率,应该怎么操作?
1)保证高纯度的siRNA或者miRNA:确保siRNA是经过PAGE纯化和脱盐处理过的,高纯度的siRNA或者miRNA有助于获得较高的转染效率。
2)保证细胞状态:通常,细胞密度达到70%-80%才可以进行转染,且要保证细胞代数较短,生长活力较好,从而避免产生较大的细胞毒性。
3)避免RNA降解:整个实验过程使用无RNA酶和无热原性的材料,如离心管、枪头、缓冲液等。
4)预实验进行转染试剂与RNA比例的摸索:不同细胞系对于转染试剂的耐受度不一样,适宜的RNA浓度也不一样,需要预实验进行梯度实验摸索,才能在正式实验时保证较高的转染效率。
5)保证无血清或者低血清培养环境:尝试使用无血清或低血清培养基,避免转染试剂和RNA的结合受到干扰影响转染效果。转染时,siRNA和脂质体稀释液要用Opti-MEM 无血清培养基。转染后4-6h 可选择换液。
产品信息
产品名称 |
产品货号 |
Celthy siRNA/miRNA In vitro transfection reagent |
C130004 |
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产品名称 |
产品货号 |
Celthy Univer Liposomal Transfection Reagent |
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